AF46是一款雙波長(cháng),高精度紫外線(xiàn)吸收分析儀,專(zhuān)為在線(xiàn)操作而設計,可提供濃度測量結果,并具有出色的可重復性,線(xiàn)性和分辨率。波長(cháng)和光程長(cháng)度可以單獨配置以滿(mǎn)足特定要求,以實(shí)現精度。 AF46是一款雙波長(cháng)紫外線(xiàn)分析儀,非常適合在下游生物技術(shù)應用(例如色譜或過(guò)濾)中監測蛋白質(zhì)濃度(例如,單克隆抗體)。使用兩個(gè)不同的波長(cháng),傳感器能夠檢測到非常低的蛋白質(zhì)濃度以進(jìn)行準確的合并,同時(shí)能夠使用第二個(gè)波長(cháng)以非常高的光密度(OD)監控整個(gè)洗脫峰。 除了蛋白質(zhì)測量外,傳感器通常還用于監測蛋白質(zhì)溶液的核酸污染。由于模塊化,可以組合使用不同的光程長(cháng)度(OPL)和波長(cháng)來(lái)測量在UV范圍內吸收的任何產(chǎn)品。 紫外分析儀分為很多系列,有三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、可照相紫外分析儀等系列,不同的紫外分析儀有不同的用途。AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀采用不同波長(cháng)引進(jìn)電泳分析、檢測,PCR產(chǎn)物檢測,DNA指紋圖譜分析,紙層分析或薄層分析等。圖片僅介紹了三用紫外分析儀的外形。 AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀在生物學(xué)研究應用 物質(zhì)經(jīng)過(guò)紫外線(xiàn)照射后發(fā)出熒光的現象可分為兩種情況,一種是自發(fā)熒光,如葉綠素、血紅素等經(jīng)紫外線(xiàn)照射后,能發(fā)出紅色的熒光,稱(chēng)為自發(fā)熒光;二種是誘發(fā)熒光,即物體經(jīng)熒光染料染色后再通過(guò)紫外線(xiàn)照射發(fā)出熒光,稱(chēng)為誘發(fā)熒光。 熒光技術(shù)在生物化學(xué)及分子生物學(xué)研究中應用主要包括以下幾個(gè)方面: 1、AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀物質(zhì)的定性:不同的熒光物質(zhì)有不同的激發(fā)光譜和發(fā)射光譜,因此可用熒光進(jìn)行物質(zhì)的鑒別。與吸收光譜法相比,熒光法具有更高的選擇性。 2、AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀定量測定:利用在較低濃度下熒光強度與樣品濃度成正比這一關(guān)系可以定量分析樣品中熒光組分的含量,常用于測定氨基酸、蛋白質(zhì)、核酸的含量。熒光定量測定的一個(gè)優(yōu)點(diǎn)是靈敏度高,例如維生素B2的測定*可達1毫微克/毫升,這一優(yōu)點(diǎn)使測定時(shí)所需要樣品量大大減少。 這種定量測定方法還可應用于酶催化的反應,只要反應前后有熒光強度的變化,就可用來(lái)測定酶的含量及酶反應的速率等。 3、AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀研究生物大分子的物理化學(xué)特性及其分子的結構和構象:熒光的激發(fā)光譜、發(fā)射光譜、量子產(chǎn)率和熒光壽命等參數不僅和分子內熒光發(fā)色基團的本身結構有關(guān),而且還強烈地依賴(lài)于發(fā)色團周?chē)沫h(huán)境,即對周?chē)h(huán)境十分敏感。利用此特點(diǎn)可通過(guò)測定上述有關(guān)熒光參數的變化來(lái)研究熒光發(fā)色團所在部位的微環(huán)境的特征及其變化。在此研究中,除了利用生物大分子本身具有的熒光發(fā)色團(如色氨酸、酪氨酸、鳥(niǎo)苷酸等,此類(lèi)熒光稱(chēng)為內源熒光)以外,可將一些特殊的熒光染料分子共價(jià)地結合或吸附在生物大分子的某一部位,通過(guò)測定該染料分子的熒光特性變化來(lái)研究生物大分子,這種染料分子被稱(chēng)為“熒光探針”,它們發(fā)出的熒光一般稱(chēng)為外源熒光。熒光探針的應用,大大地開(kāi)拓了熒光技術(shù)在分子生物學(xué)中的應用范圍。 4、AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀利用熒光壽命、量子產(chǎn)率等參數可以研究生物大分子中的能量轉移現象:通過(guò)該現象的研究,可以獲得生物大分子內部的許多信息。 以往人們常用熒光偏振做指標來(lái)研究生物大分子動(dòng)力學(xué)。人們趨于用熒光偏振隨時(shí)間的衰減來(lái)研究這些問(wèn)題。在這種方法中,激發(fā)光不是一連續的面偏振光,而是一偏振的光脈沖,因此測得的F∥和F是在兩個(gè)不同方向上偏振的熒光隨時(shí)間的衰減,它既和熒光壽命τ有關(guān),又與分子在溶液中的運動(dòng)有關(guān),因此常表示為F∥(t)和F⊥(t)。由它們可得一相當重要的物理量——各向異性參數A(t)。由A(t)可推測生物大分子的形狀、分子轉動(dòng)弛豫時(shí)間(即從一個(gè)定向的狀態(tài)到一個(gè)無(wú)定向狀態(tài)所要的時(shí)間),進(jìn)而可以推知生物大分子的大小、分子在溶液中的轉動(dòng)角度和時(shí)間之間的函數關(guān)系。由這些結果可以研究分子之間的相互作用、分子間結合的緊密程度、蛋白質(zhì)、核酸分子的解聚程度等等。 另外,AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀在免疫學(xué)中亦有廣泛的應用。重要的就是熒光抗體法。將某些熒光染料與血清抗體相結合,這種標記的抗體仍可專(zhuān)一地與相應抗原發(fā)生結合,形成的復合體具有熒光特性,從而可以確定抗原或抗體的存在及其含量。 利用熒光技術(shù)設計的AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀主要是物質(zhì)的定性方面的應用,包括: ⑴在科學(xué)實(shí)驗工作中檢測,許多主要物質(zhì)如蛋白質(zhì)、核苷酸等。 ⑵在藥物生產(chǎn)和研究中,可用來(lái)檢查激素生物堿,維生素等各種能;產(chǎn)生熒光藥品質(zhì)量,特別適宜作薄層分析和紙層分析斑點(diǎn)和檢測。 ⑶在染料涂料橡膠、石油等化學(xué)行業(yè)中,測定各種熒光材料,熒光指示劑及添加劑,鑒別不同種類(lèi)的原油和橡膠制品。 ⑷紡織化學(xué)纖維中可測定不同種類(lèi)的原材料。如羊毛,真絲人造纖維,棉花,合成纖維,并可檢查成品質(zhì)量。 ⑸在糧油,蔬菜,食品部門(mén),可用于檢查毒素(如黃曲/霉素等),食品添加劑,變質(zhì)的蔬菜、水果、可可豆、巧克力、脂肪、蜂蜜、糖蛋等的質(zhì)量。 ⑹在地質(zhì)、考古等部門(mén),可起到發(fā)現各種礦物質(zhì),判別文物化石的真偽。 ⑺在部門(mén)可檢查指紋、測定密寫(xiě)字跡等。 AF46型美國OPTEK紫外線(xiàn)分析儀用于 紫外線(xiàn)范圍: 0-0.05至2 CU(濃度單位),取決于所使用的濾波器/ OPL 紫外線(xiàn)吸收控制和紫外線(xiàn)吸收控制 色譜中的應用:柱前/柱后監控(OD),用于優(yōu)化合并 滲透物或截留物中的濃度 在TFF中/超濾 水/冷凝水中有機負荷的變化 芳烴(己內酰胺,苯胺,苯酚等)的濃度 作為T(mén)OC,COD,BOD趨勢分析 水的消毒控制處理
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